Detection and expression of SapS, a class C nonspecific acid phosphatase with O-phospho-L- tyrosine-phosphatase activity, in Staphylococcus aureus isolates from patients with chronic osteomyelitis / Detección y expresión de SapS, una fosfatasa ácida no específica de clase C con actividad de fosfatasa O-fosfotirosina, en aislamientos de Staphylococcus aureus de pacientes con osteomielitis crónica

Introduction. The identity of Staphylococcus aureus virulence factors involved in chronic osteomyelitis remains unresolved. SapS is a class C non-specific acid phosphatase and a well-known virulence factor that has been identified in S. aureus strain 154 but in protein extracts from rotting vegetables. Objective. To identify the SapS gene and characterize the activity of SapS from S. aureus strains: 12 isolates from bone infected samples of patients treated for chronic osteomyelitis and 49 from a database with in silico analysis of complete bacterial genomes. Materials and methods. The SapS gene was isolated and sequenced from 12 S. aureus clinical isolates and two reference strains; 49 S. aureus strains and 11 coagulase-negative staphylococci were tested using in silico PCR. Culture media semi-purified protein extracts from the clinical strains were assayed for phosphatase activity with p-nitro-phenyl- phosphate, O-phospho-L-tyrosine, O-phospho-L-serine, and OphosphoL-threonine in conjunction with various phosphatase inhibitors. Results. SapS was detected in the clinical and in-silico S. aureus strains, but not in the in silico coagulase-negative staphylococci strains. Sec-type I lipoprotein-type N-terminal signal peptide sequences; secreted proteins, and aspartate bipartite catalytic domains coding sequences were found in the SapS nucleotide and amino acid sequence analysis. SapS dephosphorylated with p-nitro-phenyl-phosphate and ophosphoLtyrosine were selectively resistant to tartrate and fluoride, but sensitive to vanadate and molybdate. Conclusion. SapS gene was found in the genome of the clinical isolates and the in silico S. aureus strains. SapS shares biochemical similarities with known virulent bacterial, such as protein tyrosine phosphatases, suggesting it may be a virulence factor in chronic osteomyelitis.

Introducción. Se desconoce la identidad de los factores de virulencia de Staphylococcus aureus implicados en la osteomielitis crónica. Sin embargo, SapS, una fosfatasa ácida no específica de clase C, es un factor de virulencia reconocido y ya fue identificada en la cepa 154 de S. aureus, pero en extractos proteicos de vegetales podridos. Objetivo. Detectar el gen SapS y caracterizar la actividad de la fosfatasa SapS en cepas de S. aureus aisladas de pacientes con osteomielitis crónica y en las reportadas en una base de datos de análisis in silico de genomas bacterianos completos. Materiales y métodos. Se aisló y secuenció el gen SapS en los 12 aislamientos clínicos de S. aureus y en dos cepas de referencia; estas secuencias se analizaron junto con las secuencias de las cepas reportadas en la base de datos de genomas bacterianos: 49 cepas de S. aureus y 11 cepas de estafilococos negativos para coagulasa. Se evalúo la actividad de la fosfatasa SapS, presente en los extractos de los sobrenadantes de los cultivos de las cepas clínicas, mediante la hidrólisis de fosfato p-nitrofenil, O-fosfo-L- tirosina, O-fosfo-L serina y O-fosfo-L treonina junto con varios inhibidores de fosfatasas. Resultados. Se detectó el gen SapS en el genoma de las cepas clínicas y en las 49 cepas de S. aureus analizadas in silico, pero no en las 11 cepas de estafilococos negativos para coagulasa. La secuenciación de SapS reveló un péptido señal presente en el extremo N-terminal de proteínas extracelulares y los dominios bipartitos de aspartato (DDDD) en su sitio catalítico. SapS hidroliza selectivamente el fosfato p-nitrofenil y la O-fosfo-L-tirosina, pero es sensible a vanadato y molibdato. Conclusión. Se encontró SapS en el genoma de S. aureus de las cepas clínicas y de las cepas de simulación computacional. La SapS con actividad específica para la hidrólisis de la O-fosfo-L-tirosina comparte similitudes bioquímicas con las fosfatasas-tirosina bacterianas, por lo que puede formar parte de la red de factores de virulencia de la osteomielitis crónica.

Análisis molecular por PCR múltiple anidada para virus de la familia herpes en la parálisis facial periférica idiopática / Molecular analysis by multiplex nested PCR for herpes virus family in idiopathic peripheral facial paralysis

En el Instituto Nacional de Rehabilitación, la parálisis facial periférica idiopática (PFPI) ocupa uno de los diez primeros lugares de atención. Su etiología aún es desconocida; sin embargo, se han identificado los virus de la familia herpes (HSV) como posibles agentes causales. Objetivo: Detectar el ADN de virus HSV-1 y HVS-2, citomegalovirus (CMV) y varicela zóster (VZV) en pacientes con PFPI y correlacionar su presencia con la presentación clínica de la enfermedad. Métodos: Se extrajo el ADN de la fracción leucocitaria de 62 muestras de pacientes con PFPI. La amplificación del ADN viral se realizó por PCR múltiple anidada con oligonucleótidos específicos para cada virus. La determinación de IgG e IgMse realizó por el método de ELISA. Resultados: La PCR mostró 22 (35.5%) casos positivos para HSV-1,1(1.6%) para HSV-2, 1 (1.6%) para VZV, 3 (4.8%) para CMV. La seroprevalencia mostró que 55 (88.7%) casos presentaron niveles altos de IgG para HSV-1 y 2, 2 (3.22%) para IgG-VZV y 5 (8.1%) para IgMCMV. Tanto los casos positivos como los negativos para HSV-1 no establecieron diferencias significativas con la edad, sexo, lateralidad, síntomas, grado de parálisis facial y la temporada en la que se presentó la parálisis. Conclusión: El virus más frecuente encontrado en nuestros pacientes fue el HSV-1 lo que sugiere una fuerte asociación entre la presencia de HSV-1 y la aparición de PFPI...

Caracterización fenotípica de Staphylococcus epidermidis aislado de pacientes con endoftalmitis / Phenotypic characterization of Staphylococcus epidermidis isolated from patients with endophthalmitis

Objetivo: Conocer las características fenotípicas de Staphylococcus epidermidis aislado de endoftalmitis relacionadas con el implante de lente intraocular de metilmetacrilato, su capacidad para formar biofilm y adherencia a proteínas de matriz extracelular y poliestireno. Métodos: Se estudiaron cinco cepas de Staphylococcus epidermidis aisladas de enfermos con endoftalmitis posterior la extracción del cristalino con implante de lente intraocular. Se investigó si estas cepas se adhieren a poliestireno, a colágena tipo I y a fibronectina, así como si las bacterias eran formadoras de biofilm. Al final se extrajeron las proteínas de superficie de las bacterias y se analizaron por electroforesis en gel de poliacrilamida. Resultados: Se encontró que las cinco cepas se unieron al poliestireno y que lo hicieron con mayor eficacia en la fase de crecimiento exponencial, con máxima adherencia a los 105 minutos; las cinco cepas se adhirieron a fibronectina y solo dos (CV y EN) a colágena. Dos cepas (CV y EN) fueron débiles formadoras de biofilm. Se identificaron proteínas que por peso molecular corresponden con las informadas en la literatura como proteínas de unión a biomateriales. Conclusiones: Las cepas estudiadas al no ser formadoras de biofilm tendrían que ser consideradas no patógenas, pero cumplen con el paso inicial de la patogenicidad, la adherencia, además de que fueron aisladas de un proceso infeccioso intraocular y produjeron endoftalmitis cuando fueron inoculadas en ojos de conejo.

OBJECTIVE: To carry out the phenotypic characterization of Staphylococcus epidermidis isolated from endophthalmitis developed after cataract extraction and implantation of an intraocular lens. This bacteria produces a biofilm, adheres to polystyrene and host proteins such as collagen and fibronectine, significant virulence factors. METHODS: Five S. epidermidis strains were isolated from cases of endophthalmitis, they developed after crystalline extraction and implantation of an intraocular lens. We assessed if these strains adhere to polystyrene, to Type I collagen and to fibronectine and if bacteria produced biofilm. Finally, the bacterial surface proteins were obtained and analyzed using polyacrylamide gel electrophoresis. RESULTS: All five bacterial strains adhered to polystyrene, with a maximum adherence time of 105 min; they also displayed adherence to fibronectine but only two to collagen. Only two strains were weak biofilm producers. We identified proteins that by molecular weight are similar to those identified in the literature as proteins binding to biomaterials. CONCLUSIONS: As the strains that we studied were not biofilm-forming they should be considered as non-pathogenic. Nevertheless, they meet the initial criteria of pathogenicity and adherence, aside from being isolated from an intraocular infectious process and being able to provoke endophtalmitis when inoculated in rabbit eyes.

Rinomanometría, función mucociliar y citología nasal en la evaluación de aire caliente / Rhinomanometry, mucociliar function and nasal citology in the evaluation of warm air

Se estudiaron 75 pacientes para evaluar el uso de aire caliente en pacientes con rinitis alérgica. El rango de edad de los pacientes fue de 10 a 69 años con un media de 32.8. Los resultados preliminares de este estudio demostraron que con la inhalación de aire caliente, hay un aumento de la resistencia nasal de 0.215 a los 3 y 5 minutos posteriores, sin variar a las 2 horas P < 0.05. La función mucociliar se midión por la prueba de sacarina, se encontró una correlación significativa entre los dos grupos de pacientes, con aire caliente y con aire normal gama = .972, pero sin ser significativo P > 0.01. La citología nasal no demostró anomalías morfológicas en el grupo estudiado

Valores séricos normales de inmunoglobulina E (IgE) en una población pediátrica mexicana / Normal serum values of immunoglobulin E (IgE) in a Mexican pediatric population

Considerando la importancia que tiene conocer los valores normales de la inmunoglobulina E (IgE) sobre todo en niños en los cuales se sospecha algún problema atópico, se estudiaron 451 recién nacidos y 302 niños sanos con edades que fluctuaban entre 6 meses y 10 años de edad. En los primeros se hizo una toma de sangre del cordón umbilical y en los segundos, se utilizó una muestra de sangre que por algún otro motivo no relacionado con el estudio, se hizo la toma de ésta. En la población se tuvo cuidado que ninguno de los niños estudiados tuviera antecedentes atópicos o tuvieran alguna enfermedad de este tipo. La concentración de la proteína se cuantificó por medio de un sistema inmunoenzimático. Se analizaron las características de sexo, tiempo de gestación y antecedentes atópicos en los recién nacidos. La concentración de IgE para todas las edades se presentan con su media geométrica, así como con una y dos desviaciones estándar. En base a las concentraciones aquí reportadas, será más fácil poder saber, en qué pacientes esta inmunoglobulina se encuentra elevada